實(shí)驗(yàn)步驟:1.取出六孔板2.將六孔板做好標(biāo)記3.用marker筆在6孔板背后4.大約間隔0.5~1cm,每孔做5個標(biāo)記5.用直尺比著,均勻的劃橫線6.橫穿過孔,每孔至少穿過5條線7.每孔加入2mL培養(yǎng)基8.每孔加入約5×105個細(xì)胞9.具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿10.將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)11.取出培養(yǎng)板12.顯微鏡下觀察細(xì)胞密度為100%即可進(jìn)行劃痕檢測13.將培養(yǎng)板放入操作
2022-03-14 管理員 495
細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)步驟:1、轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)試劑展示:Opti-MEM培養(yǎng)基,miRNA,Lipofectamine? 2000 Transfection Reagent;2、取出6孔培養(yǎng)板;3、提前做好標(biāo)記;4、每孔加入2mL培養(yǎng)基;5、調(diào)整細(xì)胞濃度,每孔加入5×10^5 個細(xì)胞;6、混勻細(xì)胞;7、將6孔板放入培養(yǎng)箱,過夜培養(yǎng),使細(xì)胞貼壁;8、取出3個1.5mL EP管,做好標(biāo)記,2個miRNA管,1個Lip
2021-12-28 管理員 348
CCK8檢測實(shí)驗(yàn)步驟:1、消化收集細(xì)胞;2、1500r/m離心3min;3、棄去上清;4、吸去殘留液體;5、培養(yǎng)基重懸細(xì)胞;6、細(xì)胞計數(shù);7、取出96孔板,做好標(biāo)記;8、調(diào)整細(xì)胞懸液濃度;9、搖晃培養(yǎng)瓶,混勻細(xì)胞;10、分于96孔板,每孔100μL;11、置 37℃、5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜,使細(xì)胞貼壁;12、吸去培養(yǎng)基;13、按照分組加入含有藥物的培養(yǎng)基;14、置 37℃、5%CO2 培養(yǎng)箱
2021-11-26 道賽爾生物 193
完全培養(yǎng)基的配制實(shí)驗(yàn)流程1、 所有的操作均需在細(xì)胞間的超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行2、 消毒——用75%的酒精對培養(yǎng)基、血清、青鏈霉素混合液(雙抗)進(jìn)行消毒3、 提取和注入——完全培養(yǎng)基一般將血清、培養(yǎng)基、青鏈霉素混合液(雙抗)按照10:90:1的比例進(jìn)行配比 3.1配制200mL完全培養(yǎng)基 3.2先加入180mLDMEM培養(yǎng)基 3.3加入20mL胎牛血清 3.4加入2mL青鏈霉素混合
2021-10-29 管理員 2662
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇技術(shù)是細(xì)胞培養(yǎng)過程中較為基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)操作,此舉對于細(xì)胞的保種以及細(xì)胞活力的維持有著重要意義。關(guān)于此實(shí)驗(yàn)也可以參考以下技術(shù)文章:http://www.vnkw.cn/tech_support/shownews.php?id=40細(xì)胞復(fù)蘇與凍存操作步驟:1.將凍存的細(xì)胞從液氮罐中取出2.移至37℃水浴中,使細(xì)胞迅速融化3.用酒精給手消毒4.將所需培養(yǎng)基,要復(fù)蘇的細(xì)胞用酒精消毒后,拿入
2021-09-23 道賽爾生物 545
細(xì)胞的消化傳代操作步驟:1.點(diǎn)燃酒精燈,用酒精棉球擦拭臺面;用酒精噴壺給手及所需使用的試劑瓶表面消毒2.使用鑷子小心的打開培養(yǎng)瓶瓶蓋3.倒出廢液4.加入2mlPBS清洗兩遍細(xì)胞5.加入1ml胰酶消化6.放入培養(yǎng)箱計時3分鐘,具體時間因細(xì)胞而異,黏附越強(qiáng),消化時間越長7.對光觀察細(xì)胞狀態(tài),是否變成霧狀清晰可見8.最好在鏡下觀察細(xì)胞變圓時終止消化9.加入1ml培養(yǎng)基終止消化10.槍頭輕輕吹打,使培養(yǎng)瓶
2021-07-20 道賽爾生物 623
在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中所需的基本設(shè)備包括:細(xì)胞培養(yǎng)所使用的超凈工作臺、細(xì)胞培養(yǎng)箱、水浴(鍋)、離心機(jī)、冰箱、細(xì)胞計數(shù)儀以及觀察細(xì)胞的顯微鏡,此外還需要用到細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)基和其他試劑耗材,移液管和廢液桶。細(xì)胞換液操作步驟為:首先操作前請注意:所有操作需要在無菌環(huán)境下進(jìn)行;1.先用酒精給所有物品表面消毒,酒精棉球擦拭工作臺面。2.撕開封口膜,所有操作需要在酒精燈附近操作3.吸棄廢液4.用PBS清洗兩遍5.
2021-06-23 道賽爾生物 848