細胞轉染實驗步驟：

1、轉染實驗試劑展示：Opti-MEM培養基，miRNA，Lipofectamine? 2000 Transfection Reagent；

2、取出6孔培養板；

3、提前做好標記；

4、每孔加入2mL培養基；

5、調整細胞濃度，每孔加入5×10^5 個細胞；

6、混勻細胞；

7、將6孔板放入培養箱，過夜培養，使細胞貼壁；

8、取出3個1.5mL EP管，做好標記，2個miRNA管，1個Lip2000管；

9、其中2個miRNA管每管加入250μL Opti-MEM培養基；

10、Lip2000管加入500μL Opti-MEM培養基；

11、Lip2000管加入10μL Lipofectamine? 2000 Transfection Reagent，輕輕吹吸混勻；

12、miRNA管每管加入5μL（100pmol）miRNA，輕輕吹吸混勻；

13、室溫下靜置 5 min；

14、將Lip2000管液體按照每管255μL緩緩加入miRNA管，輕輕吹吸混勻；

15、室溫靜置20min；

16、取出培養板，吸除培養基；

17、每孔加入1.5mL新鮮培養基；

18、將510μL復合物加入對應孔中；

19、輕輕晃動6孔板；

20、將6孔板放入培養箱；

21、培養4h后取出培養板；

22、吸除培養基；

23、每孔加入2mL新鮮培養基；

24、將6孔板放入培養箱，培養24h-72h后進行后續檢測。

細胞轉染（1）

細胞轉染（2）

細胞轉染（3）