實(shí)驗(yàn)步驟：

1.取出六孔板

2.將六孔板做好標(biāo)記

3.用marker筆在6孔板背后

4.大約間隔0.5~1cm，每孔做5個(gè)標(biāo)記

5.用直尺比著，均勻的劃橫線

6.橫穿過孔，每孔至少穿過5條線

7.每孔加入2mL培養(yǎng)基

8.每孔加入約5×10⁵個(gè)細(xì)胞

9.具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿

10.將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)

11.取出培養(yǎng)板

12.顯微鏡下觀察細(xì)胞密度為100%即可進(jìn)行劃痕檢測

13.將培養(yǎng)板放入操作臺

14.用移液器取1mL槍頭套一個(gè)200μL槍頭

15.取下槍頭，比著培養(yǎng)板蓋子，盡量垂至于背后的橫線劃痕

16.槍頭要垂直，不能傾斜，注意不要碰到蓋子

17.動作要快速，果斷，不宜過重或過輕

18.去除培養(yǎng)基

19.用PBS清洗去除劃下的細(xì)胞

20.加入含不同藥物的無血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)

21.在0h、48h分別拍照，拍照時(shí)選取記號筆畫的線和細(xì)胞劃痕的交點(diǎn)作為觀察點(diǎn)，以定點(diǎn)觀察。

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)（1）

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)（2）