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• 細胞培養(yǎng)基的基本要求(細胞培養(yǎng)基,培養(yǎng)基,滲透壓,激素)

  體外培養(yǎng)的細胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基應能滿足細胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。一、營養(yǎng)成分 維持細胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個方面： 1.氨基酸： 是細胞合成蛋白質(zhì)的原料。所有細胞都需要12種必須氨基酸：纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺，它在細胞代謝過程中有重要作用，所

  2021-08-08 道賽爾生物 187

• 細胞培養(yǎng)基礎篇-復蘇

  細胞培養(yǎng)看似簡單，但實則有很多細節(jié)需要注意，今天就從最基礎的細胞復蘇說起，當然內(nèi)容主要還是針對新入門的“學徒”，如有不足之處，也請廣大站友不吝賜教。操作步驟：1.從液氮罐中取出凍存管，放入37度水浴鍋中融化，800-1000rpm離心3-5min；2.慢慢吸去上清，加入適量完全培養(yǎng)基重懸細胞團，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿或細胞瓶；3.補足完全培養(yǎng)基，放37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意細節(jié)：1.從液氮罐中拿出凍存管時要做

  2021-08-07 道賽爾生物 405

• 細胞培養(yǎng)基礎篇-傳代

  傳代是貼壁細胞培養(yǎng)過程中不可或缺的一步，也是最容易出問題的一步，今天就來說下細胞傳代的操作步驟和注意細節(jié)。操作步驟：1.用移液器吸走原培養(yǎng)基，加入適量PBS洗1-2遍；2.加入適量胰酶，置于培養(yǎng)箱中消化；3.待消化到位后加入適量血清或完全培養(yǎng)基終止消化，800-1000rpm離心3-5min；4.去上清，加入適量完全培養(yǎng)基重懸后轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿，放37度培養(yǎng)箱。注意細節(jié)：1.吸走原培養(yǎng)基時盡量吸盡，用

  2021-08-06 道賽爾生物 293

• 【主題學習】細胞實驗總結(jié)

  MTT原理：MTT是一種檢測細胞功能的方法。細胞在活化增殖的過程中，線粒體的能量代謝能夠把MTT代謝為藍紫色的甲臜，甲臜沉積于細胞內(nèi)或細胞周圍，形成甲臜的量與細胞活化的程度成正比，通過鹽酸異丙醇或其他溶劑溶解甲臜，用酶標儀測溶液的光密度就可以反映甲臜的量并從而判斷細胞活化增殖的程度。步驟：1、培養(yǎng)好細胞種板。 養(yǎng)細胞沒啥好說的，如果不知道細胞如何養(yǎng)，那就看看相關(guān)的文獻方法。如果知道了細

  2021-08-05 道賽爾生物 451

• 如何選擇合適的細胞培養(yǎng)基

  MEM細胞培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)是實驗室里最常見和最基本的實驗了，但卻不是最簡單的。別小看細胞培養(yǎng)，這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染 、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Invitrogen (GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DM

  2021-08-04 道賽爾生物 615

• 【主題學習】細胞凍存與復蘇及細胞計數(shù)存活測試的操作方法與步驟

  細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng)的常規(guī)工作，可以解決細胞因為連續(xù)繼代造成的退變或轉(zhuǎn)化。細胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)以及細胞凍存和復蘇后都需要細胞計數(shù)。一、細胞冷凍保存1、材料：生長良好之培養(yǎng)細胞、新鮮培養(yǎng)基、DMSO (Sigma D-2650)、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene　5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球計數(shù)盤與蓋玻片、等速降

  2021-08-03 道賽爾生物 401

• 【專題討論】細胞培養(yǎng)的成功因素——細胞消化篇

  許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。今天，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，一起討論：1、其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足

  2021-08-02 道賽爾生物 543