細胞培養看似簡單，但實則有很多細節需要注意，今天就從最基礎的細胞復蘇說起，當然內容主要還是針對新入門的“學徒”，如有不足之處，也請廣大站友不吝賜教。


操作步驟：

1.從液氮罐中取出凍存管，放入37度水浴鍋中融化，800-1000rpm離心3-5min；

2.慢慢吸去上清，加入適量完全培養基重懸細胞團，轉移至培養皿或細胞瓶；

3.補足完全培養基，放37度培養箱中培養。

注意細節：

1.從液氮罐中拿出凍存管時要做好防護工作，特別是避免液氮濺到眼睛里，有條件的實驗室可以配備防凍手套和護目鏡；

2.取出的凍存管要先確認管內沒有液氮，再放入37度水浴鍋，有液氮的情況下很容易因為管內壓強突然增大而導致凍存管炸裂，輕則細胞無法使用，重則傷及實驗人員；

3.融化過程中要不斷輕輕搖晃凍存管，使其盡快融化，但搖晃程度要把握得當，不能讓水浴鍋中的水滲進凍存管中；

4.離心的具體轉速和時間視細胞而定，通常難養的細胞需要降低轉速，縮短時間，以減少離心對細胞的傷害；

5.部分對離心敏感的細胞（主要是原代細胞）可以采用融化后不離心，直接重懸后補足培養基培養，待其貼壁后再換液去掉凍存液中DMSO的方式處理；

6.如果凍存細胞量不多，可以在凍存管蓋上標注離心方向，以便確定離心后細胞團位置，吸去上清時調整凍存管角度，使細胞團位于最下方，可以盡量減少細胞損失。