對于貼壁生長的細胞，相對來說比較簡單但也很麻煩。以下我主要討論貼壁生長的細胞。

     在討論之前，大家首先要有一個概念，即潔凈區，并不是沒有細菌，而是細菌的數量非常少，國家標準100級的潔凈標準是浮游菌數不得超過5個每立方米，沉降菌數不得超過1個每培養皿.而國外的標準比我國的還要高一點，要求的數量更少。

     所以在我們的潔凈操作臺里，并不是真正一個細菌都沒有的，所以在操作的時候還是要盡量利索迅速地完成操作。盡量減少進入培養體系細菌的數量。

     所以處理細菌污染的重要原則就是：無限地稀釋細菌的濃度，無限地減少細菌的數量！

1）將污染的培養液倒掉，轉燒瓶口，加入10mlPBS，適當晃動清洗培養瓶，然后倒掉。轉燒瓶口。

2）繼續加入10mlPBS，同樣方法晃動，清洗培養瓶，然后倒掉。

3）繼續加入5mlPBS，同樣方法洗瓶，主要是培養面，然后倒掉。

4）重復步驟3再洗。

5）重復步驟3再洗。

6）加入3-5ml雙抗，洗瓶，靜置3-5分鐘，然后吸出。

7）加入3ml雙抗，洗瓶，靜置3-5分鐘，然后吸出。

8）再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。

9）加入10ml培養液，加入2ml雙抗，放置培養箱培養，5小時之后，倒掉培養基，加入PBS洗瓶兩次，然后加入胰酶消化，吹打后置于離心機800-1000r/min離心，然后洗一次。置于新的培養瓶里培養，培養體系加入2ml雙抗。

10）24h之后，視情況換液，若仍然污染嚴重，培養基渾濁，重復以上步驟，若看不到污染物，則繼續步驟1) 3） 4） 6） 8），然后加入培養液培養，培養體系加入2ml雙抗.

11)24h之后，若仍污染嚴重，可再重復一次，若還污染只能棄之（不過一般沒有出現這種情況），若鏡下不見污染物，則換液PBS洗瓶，正常培養。

     以上方法主要是針對貼壁生長的細胞，在操作的過程中，一定要小心操作動作，輕柔緩慢，切忌大動作魯莽。防止細胞脫落。以上方法操作得當，基本上都能救活你的細胞。當然如果你的細胞仍有富余或者凍存的，我還是建議你把污染的扔掉，再復蘇方便省事。