CELL-C0109 HK-2人腎近曲小管細胞
- 貨號： CELL-C0109
- 規格： 1×10?cells/T25培養瓶
- 價格： 1200元
組織來源：腎，皮質/近曲小管
生長狀態：貼壁生長
細胞形態：上皮細胞
培養條件：
培養基類型：
K-SFM培養基(Gibco，貨號10785-012)，100%
培養條件：37℃，CO2: 5%
傳代方法：
? 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態：
1) 如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒后放在培養箱靜置數小時（4h左右），穩定細胞狀態，靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。
2) 如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續培養。
? 貼壁細胞傳代方法：
1) 棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次；
2) 加1ml 0.25%的胰酶，讓胰酶與大部分細胞接觸，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分變圓后加完全培養基終止消化。
? 懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。
1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養；
2) 離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。
凍存方法：
?90%FBS，10%DMSO，現用現配。
?儲存：液氮中長期保存。
據報道，人腎近曲小管細胞HK-2含有HPV-16 E6/E7基因的重組逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7。盡管pLXSN 16 E6/E7對新霉素有抗性，但不能用G418分離轉導的克隆。該細胞系基于Southern和FISH分析可分離成單個細胞。通過PCR測定，E6/E7基因存在于HK-2基因組中。細胞保留分化良好的PTCs表型。堿性磷酸酶、γ谷氨酰轉肽酶、亮氨酸氨肽酶、酸性磷酸酶、細胞角蛋白、α3、β1整聯蛋白和纖連蛋白表達陽性。VIII因子相關抗原、6.19抗原和CALLA內肽酶表達為陰性。HK-2細胞保留著近端腎小管上皮細胞的功能特征，例如Na+依賴性/根皮苷敏感性糖轉運和腺苷酸環化酶對甲狀旁腺有響應，但對抗利尿激素不敏感。該細胞具有生成和儲存糖原的能力來證明。HK-2細胞貼壁生長，在甲基纖維素，軟瓊脂上不生長且不能懸浮生長。每個批次均通過本庫支原體檢測，結果為陰性。經本庫STR檢測無誤。STR鑒定結果為：Amelogenin: X,Y; CSF1PO: 13; D13S317: 9; D16S539: 11,12; D5S818: 12; D7S820: 10,11; THO1: 9; TPOX: 8,9; vWA: 17,18
? 訂購須知：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時撥打電話或郵箱聯系；
注：觀察細胞最好在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度；
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等；
3. 本庫細胞在培養過程不加抗生素，請客戶收到細胞后根據需要自行添加雙抗（青霉素和鏈霉素）；
4. 請用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件；
5. 本實驗室默認T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養；
6. 建議客戶收到細胞后，留存一張培養瓶外觀照片以及收到的細胞前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通交流；
7. 細胞培養過程外因太多，我們的售后保障期為一周，具體處理原則參見售后流程圖（ www.vnkw.cn）或咨詢當地銷售人員和經銷商，但不提供免費更換服務。
? 注意事項：
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 產品使用：本產品僅能用于科研。本產品未通過直接用于活體動物和人的審核。本產品未通過用于活體診斷的審核。
