物種：人

性別/周齡:女；31歲

組織來源：黑素細胞，黑素瘤 以前認為是乳腺; 乳房; 導管; 導管癌; 胸腺滲出液

生物安全等級：BSL-1

生長狀態(tài)：貼壁生長

細胞形態(tài)：紡錘形

致瘤性：

No, in immunosuppressed mice. Yes, in semisolid medium. Yes, in semisolid medium. No, in immunosuppressed mice Yes, in semisolid medium No, in immunosuppressed mice Yes, in semisolid medium

基因表達：

tubulin; actin

培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基類型：L-15（Daucell,貨號DCM0019）培養(yǎng)基

FBS（Daucell，貨號DCF8001）：10%

胰島素：0.01mg/ml

培養(yǎng)條件：37℃，空氣，100%

傳代方法：

? 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：

1) 如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時（4h左右），穩(wěn)定細胞狀態(tài)，靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。

2) 如果細胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

? 貼壁細胞傳代方法：

1) 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次；

2) 加1ml 0.25%的胰酶，讓胰酶與大部分細胞接觸，隨時觀察細胞狀態(tài)變化，待細胞大部分變圓后加完全培養(yǎng)基終止消化。

? 懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。

1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)；

2) 離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

凍存方法：

?90%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

?儲存：液氮中長期保存。