CELL-C0153 MDBK(NBL-1)牛腎細胞
- 貨號： CELL-C0153
- 規(guī)格： 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
- 價格：
物種：牛
性別/年齡:雄性；成年
組織來源：腎；正常細胞
生物安全等級：BSL-2
生長狀態(tài)：貼壁生長
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
基因表達：keratin
培養(yǎng)條件：
培養(yǎng)基類型：RPMI-1640（Daucell,貨號DCM0002）培養(yǎng)基
FBS（Daucell，貨號DCF8001）: 10%
培養(yǎng)條件：37℃，CO2: 5%
傳代方法：
? 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：
1) 如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時（4h左右），穩(wěn)定細胞狀態(tài)，靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。
2) 如果細胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
? 貼壁細胞傳代方法：
1) 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次；
2) 加1ml 0.25%的胰酶，讓胰酶與大部分細胞接觸，隨時觀察細胞狀態(tài)變化，待細胞大部分變圓后加完全培養(yǎng)基終止消化。
? 懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。
1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)；
2) 離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
凍存方法：
?90%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
?儲存：液氮中長期保存。
1957年２月18日，S.H. Madin和N.B. Darby從一只表觀正常的成年牛腎臟建立了MDBK細胞株。1973年這株MDBK細胞被牛病毒性痢疾病毒(BVDV)感染。 1982年發(fā)現(xiàn)了一株未被BVDV感染的MDBK細胞株。 這株MDBK細胞的后代經(jīng)NVSL檢測，未發(fā)現(xiàn)被任何病毒污染的證據(jù)。
在本庫通過支原體檢測。
? 訂購須知：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時撥打電話或郵箱聯(lián)系；
注：觀察細胞最好在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度；
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等；
3. 本庫細胞在培養(yǎng)過程不加抗生素，請客戶收到細胞后根據(jù)需要自行添加雙抗（青霉素和鏈霉素）；
4. 請用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件；
5. 本實驗室默認T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)；
6. 建議客戶收到細胞后，留存一張培養(yǎng)瓶外觀照片以及收到的細胞前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通交流；
7. 細胞培養(yǎng)過程外因太多，我們的售后保障期為一周，具體處理原則參見售后流程圖（ www.vnkw.cn）或咨詢當(dāng)?shù)劁N售人員和經(jīng)銷商，但不提供免費更換服務(wù)。
? 注意事項：
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 產(chǎn)品使用：本產(chǎn)品僅能用于科研。本產(chǎn)品未通過直接用于活體動物和人的審核。本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核。
MDBK(NBL-1)牛腎細胞說明書CELL-C0153.pdf