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物種：小鼠，C3H/An 品系

性別/年齡:雄；100日齡

組織來源：皮下結締組織；乳暈、脂肪

生物安全等級：BSL-1

生長狀態：貼壁生長

細胞形態：成纖維細胞

致瘤性：

Yes, in immunosuppressed mice.

培養條件：

培養基類型：MEM（Daucell，貨號DCM0001）培養基

FBS（Daucell，貨號DCF8001）: 10%

培養條件：37℃，CO2: 5%

傳代方法：

? 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態：

1) 如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒后放在培養箱靜置數小時（4h左右），穩定細胞狀態，靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。

2) 如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續培養。

? 貼壁細胞傳代方法：

1) 棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次；

2) 加1ml 0.25%的胰酶，讓胰酶與大部分細胞接觸，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分變圓后加完全培養基終止消化。

? 懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。

1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養；

2) 離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。

凍存方法：

?90%FBS，10%DMSO，現用現配。

?儲存：液氮中長期保存。

這株細胞的母細胞系-L細胞系取自100天的C3H/An小鼠的正常皮下乳暈和脂肪組織。NCTC clone 929建立于1948年3月。L細胞系是最早建立的連續培養的細胞系之一，而NCTC clone 929是最早的克隆株。本庫凍存時為P564。每個批次均通過本庫支原體檢測，結果為陰性。

? 訂購須知：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時撥打電話或郵箱聯系；

注：觀察細胞最好在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度；

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等；

3. 本庫細胞在培養過程不加抗生素，請客戶收到細胞后根據需要自行添加雙抗（青霉素和鏈霉素）；

4. 請用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件；

5. 本實驗室默認T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養；

6. 建議客戶收到細胞后，留存一張培養瓶外觀照片以及收到的細胞前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通交流；

7. 細胞培養過程外因太多，我們的售后保障期為一周，具體處理原則參見售后流程圖（ www.vnkw.cn）或咨詢當地銷售人員和經銷商，但不提供免費更換服務。

? 注意事項：

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 產品使用：本產品僅能用于科研。本產品未通過直接用于活體動物和人的審核。本產品未通過用于活體診斷的審核。

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