CELL-C0172 NR8383大鼠肺泡巨噬細胞
- 貨號： CELL-C0172
- 規格： 1×10?cells/T25培養瓶
- 價格：
物種：大鼠
組織來源：肺；巨噬細胞；肺泡
生物安全等級：BSL-1
生長狀態：半懸浮或懸浮生長并部分聚團
細胞形態：巨噬細胞
受體表達情況：Fc
基因表達情況：
transforming growth factor beta (TGF beta); interleukin 1 (IL-1); interleukin 6 (IL-6)
培養條件：
培養基類型：Ham's F-12K（Daucell,貨號DCM0018）培養基
FBS（Daucell，貨號DCF8001）: 20%
培養條件：37℃，CO2: 5%
傳代方法：
? 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態：
1) 如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒后放在培養箱靜置數小時（4h左右），穩定細胞狀態，靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。
2) 如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續培養。
? 貼壁細胞傳代方法：
1) 棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次；
2) 加1ml 0.25%的胰酶，讓胰酶與大部分細胞接觸，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分變圓后加完全培養基終止消化。
? 懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。
1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養；
2) 離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。
凍存方法：
?90%FBS，10%DMSO，現用現配。
?儲存：液氮中長期保存。
NR8383 (正常大鼠，1983年8月3日)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。 細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月。 隨后，不再需要外源生長因子。
通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞，并三次用軟瓊脂亞克隆。 細胞表現出巨噬細胞的特性，吞噬酵母多糖和銅綠，非特異性脂酶活性，Fc受體，氧化降解；分泌IL-1, TNF beta和IL-6，可重復地響應外源生長因子。
NR8383細胞響應博萊霉素，分泌TGF beta前體。
在博萊霉素刺激下，TGF beta mRNA表達也上升。 細胞對內毒素敏感。
1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達50%。 即使達到0.001毫克/毫升的水平，LPS抑制還是無毒且在后續過程中可逆的。
NR8383細胞株提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源，可以用于體外研究巨響細胞相關活性。
此細胞半懸浮生長。
在本庫通過支原體檢測。
? 訂購須知：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時撥打電話或郵箱聯系；
注：觀察細胞最好在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度；
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等；
3. 本庫細胞在培養過程不加抗生素，請客戶收到細胞后根據需要自行添加雙抗（青霉素和鏈霉素）；
4. 請用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件；
5. 本實驗室默認T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養；
6. 建議客戶收到細胞后，留存一張培養瓶外觀照片以及收到的細胞前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通交流；
7. 細胞培養過程外因太多，我們的售后保障期為一周，具體處理原則參見售后流程圖（ www.vnkw.cn）或咨詢當地銷售人員和經銷商，但不提供免費更換服務。
? 注意事項：
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 產品使用：本產品僅能用于科研。本產品未通過直接用于活體動物和人的審核。本產品未通過用于活體診斷的審核。
NR8383大鼠肺泡巨噬細胞說明書CELL-C0172.pdf