CELL-C0200 RWPE-1人前列腺上皮細胞
- 貨號： CELL-C0200
- 規格： 1×10?cells/T25培養瓶
- 價格：
物種：人
性別/年齡:男；54歲
組織來源：前列腺；正常上皮細胞
生物安全等級：BSL-2
生長狀態：貼壁生長
細胞形態：上皮細胞樣
致瘤性：
No, in nude mice (with or without Matrigel). No, in soft agar.
受體表達：
androgen receptor, expressed (upregulated upon exposure to androgen)
抗原表達：
kallikrein 3, KLK3 (prostate specific antigen, PSA); Homo sapiens, expressed (upon exposure to androgen); (upon exposure to androgen)
基因表達：
cytokeratin 18, cytokeratin 8; Tumor Supressor Gene(s): p53+, pRB+
培養條件：
培養基類型：K-SFM(Keratinocyte Serum Free Medium)
培養條件：37℃，CO2: 5%
傳代方法：
? 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態：
1) 如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒后放在培養箱靜置數小時（4h左右），穩定細胞狀態，靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。
2) 如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續培養。
? 貼壁細胞傳代方法：
1) 棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次；
2) 加1ml 0.25%的胰酶，讓胰酶與大部分細胞接觸，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分變圓后加完全培養基終止消化。
? 懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。
1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養；
2) 離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。
凍存方法：
?90%FBS，10%DMSO，現用現配。
?儲存：液氮中長期保存。
一位54歲白人男性的正常前列腺組織切片的周圍區域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒18（HPV-18）進行轉化，建立了RWPE-1。據報道，RWPE-1細胞在三維Matrigel培養時，在雄激素刺激下，形成腺胞（acini）并向培養基中分泌PSA。當與Matrigel或基質細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE-1細胞也能形成腺胞并產生PSA。來源于RWPE-1的細胞用Kirstin鼠肉瘤病毒（Ki-MuSV）轉染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2細胞和 RWPE2-W99細胞。另外，用N-甲醇-N-硝基脲（MNU）處理RWPE-1，建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株。它們分別是WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11和 WPE1-NB26細胞。據報道，RWPE-1細胞經過檢測后發現乙肝病毒、丙肝病毒和人免疫缺陷病毒都呈陰性。PCR證實該細胞系HPV病毒DNA序列呈陽性。每個批次均通過本庫支原體檢測，結果陰性。在我庫通過STR鑒定，數據上94%吻合。STR結果如下：D5S818: 12,15；D13S317: 8,14；D7S820: 10,11；D16S539: 9,11；vWA: 18；THO1: 8,9.3；Amelogenin: X,Y；TPOX: 8,11；CSF1PO: 13
? 訂購須知：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時撥打電話或郵箱聯系；
注：觀察細胞最好在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度；
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等；
3. 本庫細胞在培養過程不加抗生素，請客戶收到細胞后根據需要自行添加雙抗（青霉素和鏈霉素）；
4. 請用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件；
5. 本實驗室默認T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養；
6. 建議客戶收到細胞后，留存一張培養瓶外觀照片以及收到的細胞前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通交流；
7. 細胞培養過程外因太多，我們的售后保障期為一周，具體處理原則參見售后流程圖（ www.vnkw.cn）或咨詢當地銷售人員和經銷商，但不提供免費更換服務。
? 注意事項：
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 產品使用：本產品僅能用于科研。本產品未通過直接用于活體動物和人的審核。本產品未通過用于活體診斷的審核。
RWPE-1人前列腺上皮細胞說明書CELL-C0200.pdf