物種：人

性別/年齡：女；55歲

組織來源：器官：結(jié)腸；腫瘤分期：Dukes氏Ｃ型；疾病：結(jié)直腸腺癌

生物安全等級：BSL-1

生長狀態(tài)：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：圓形的并能折光的

致瘤性:Yes, in nude mice.

基因表達(dá):serotonin; norepinephrine; epinephrine; adrenocorticotropic hormone (ACTH); parathyroid hormone

培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基類型：RPMI-1640（Daucell,貨號DCM0002）培養(yǎng)基

FBS（Daucell，貨號DCF8001）: 10%

培養(yǎng)條件：37℃，CO2: 5%

傳代方法：

? 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)：

1) 如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時（4h左右），穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，靜置后鏡檢，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細(xì)胞生長情況。

2) 如果細(xì)胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

? 貼壁細(xì)胞傳代方法：

1) 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次；

2) 加1ml 0.25%的胰酶，讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸，隨時觀察細(xì)胞狀態(tài)變化，待細(xì)胞大部分變圓后加完全培養(yǎng)基終止消化。

? 懸浮細(xì)胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。

1) 直接傳代是讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)；

2) 離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

凍存方法：

?90%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

?儲存：液氮中長期保存。