組織來源：乳腺、胸；分離自轉移灶：胸腔積液

生長狀態：貼壁生長

細胞形態：上皮細胞

培養條件：

培養基類型：MEM（Daucell，貨號DCM0001）培養基

FBS（Daucell，貨號DCF8001）: 10%

Glutamax: 1%

Non-essential Amino Acids, 100X : 1 %

Sodium Pyruvate 100 mM Solution:1 %

human recombinant insulin: 終濃度0.01 mg/ml

培養條件：37℃，CO2: 5%

傳代方法：

? 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態：

1) 如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒后放在培養箱靜置數小時（4h左右），穩定細胞狀態，靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。

2) 如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續培養。

? 貼壁細胞傳代方法：

1) 棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次；

2) 加1ml 0.25%的胰酶，讓胰酶與大部分細胞接觸，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分變圓后加完全培養基終止消化。

? 懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。

1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養；

2) 離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。

凍存方法：

?90%FBS，10%DMSO，現用現配。

?儲存：液氮中長期保存。