從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。 從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長(zhǎng)的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。 MC3T3亞克隆4和MC3T3亞克隆14在抗壞血酸和3到4mM無(wú)機(jī)磷酸鹽中生長(zhǎng)表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。 它們10天后形成一個(gè)礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。 MC3T3亞克隆24和MC3T3亞克隆30在抗壞血酸中生長(zhǎng)表現(xiàn)出很差的成骨細(xì)胞分化。 不形成ECM， 可以作為亞克隆4和14的陰性對(duì)照。 礦化的亞克隆選擇的表達(dá)作為成骨細(xì)胞標(biāo)記的mRNA，及唾液酸糖蛋白(BSP)，骨鈣素(OCN)，和甲狀旁腺激素/甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白受體的mRNA。 高或者低的分化潛能的亞克隆在培養(yǎng)中生產(chǎn)出相似數(shù)量的膠原質(zhì)，表達(dá)可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1，一種成骨細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子。 植入免疫缺陷小鼠以后，高分化性的亞克隆形成與骨類似的形成小骨的編織骨，低分化細(xì)胞只是產(chǎn)生纖維組織。 這些細(xì)胞系是研究體外成骨細(xì)胞分化的好模型，尤其是ECM信號(hào)。 它們和原代培養(yǎng)顱頂成骨細(xì)胞的行為類似。 在本庫(kù)通過(guò)支原體檢測(cè)。

? 訂購(gòu)須知：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)撥打電話或郵箱聯(lián)系；

注：觀察細(xì)胞最好在低倍鏡下觀察，便于整體估計(jì)細(xì)胞密度；

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等；

3. 本庫(kù)細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程不加抗生素，請(qǐng)客戶收到細(xì)胞后根據(jù)需要自行添加雙抗（青霉素和鏈霉素）；

4. 請(qǐng)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件；

5. 本實(shí)驗(yàn)室默認(rèn)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)；

6. 建議客戶收到細(xì)胞后，留存一張培養(yǎng)瓶外觀照片以及收到的細(xì)胞前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通交流；

7. 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程外因太多，我們的售后保障期為一周，具體處理原則參見售后流程圖（ www.vnkw.cn）或咨詢當(dāng)?shù)劁N售人員和經(jīng)銷商，但不提供免費(fèi)更換服務(wù)。

? 注意事項(xiàng)：

1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 產(chǎn)品使用：本產(chǎn)品僅能用于科研。本產(chǎn)品未通過(guò)直接用于活體動(dòng)物和人的審核。本產(chǎn)品未通過(guò)用于活體診斷的審核。

MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14說(shuō)明書CELL-C0378.pdf