CELL-C0543 LNCaP?clone?FGC人前列腺癌細(xì)胞
- 貨號(hào): CELL-C0543
- 規(guī)格: 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
- 價(jià)格: 1200元
組織來(lái)源:前列腺;來(lái)自轉(zhuǎn)移灶:左鎖骨上淋巴結(jié)
生長(zhǎng)狀態(tài):貼壁生長(zhǎng);單細(xì)胞及松散貼壁的細(xì)胞簇
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)條件:
培養(yǎng)基類型:RPMI-1640(Daucell,貨號(hào)DCM0002)培養(yǎng)基
FBS(Daucell,貨號(hào)DCF8001): 10%
Cellbind 細(xì)胞培養(yǎng)瓶(Corning ,貨號(hào)3289)
培養(yǎng)條件:37℃,CO2: 5%
傳代方法:
? 收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài):
1) 如果沒(méi)長(zhǎng)滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時(shí)(4h左右),穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),靜置后鏡檢,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
2) 如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
? 貼壁細(xì)胞傳代方法:
1) 棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次;
2) 加1ml 0.25%的胰酶,讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸,隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓后加完全培養(yǎng)基終止消化。
? 懸浮細(xì)胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。
1) 直接傳代是讓?xiě)腋〖?xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng);
2) 離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi), 1000rpm,5分鐘,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
凍存方法:
?90%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
?儲(chǔ)存:液氮中長(zhǎng)期保存。
人前列腺癌細(xì)胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結(jié)針刺活檢中分離,該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。 這株細(xì)胞對(duì)5-α-二氫睪酮(生長(zhǎng)調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應(yīng)。 這株細(xì)胞并不形成一致的單層,而是形成集落,在傳代時(shí)可以用滴管反復(fù)吹吸打碎。 它們僅僅輕輕地吸附在基底上,不形成匯合,很快使培養(yǎng)基變酸。 生長(zhǎng)很慢。 傳代后48小時(shí)內(nèi)不應(yīng)擾動(dòng)。 當(dāng)培養(yǎng)瓶封包后,多數(shù)細(xì)胞從培養(yǎng)瓶底分離,懸浮在培養(yǎng)基中。 收到后,在通常培養(yǎng)單層細(xì)胞的條件下培養(yǎng)24到48小時(shí),以使細(xì)胞再貼壁。 此后可以換上新鮮培養(yǎng)液。 如果需要,培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)容物可以收集,300g離心15分鐘,以10毫升培養(yǎng)液重懸并培養(yǎng)到一個(gè)單獨(dú)的培養(yǎng)瓶中。請(qǐng)使用Corning的Cellbind培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。 在本庫(kù)通過(guò)支原體檢測(cè)。 在本庫(kù)通過(guò)STR檢測(cè)。
? 訂購(gòu)須知:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)撥打電話或郵箱聯(lián)系;
注:觀察細(xì)胞最好在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度;
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等;
3. 本庫(kù)細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程不加抗生素,請(qǐng)客戶收到細(xì)胞后根據(jù)需要自行添加雙抗(青霉素和鏈霉素);
4. 請(qǐng)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;
5. 本實(shí)驗(yàn)室默認(rèn)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng);
6. 建議客戶收到細(xì)胞后,留存一張培養(yǎng)瓶外觀照片以及收到的細(xì)胞前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通交流;
7. 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程外因太多,我們的售后保障期為一周,具體處理原則參見(jiàn)售后流程圖( www.vnkw.cn)或咨詢當(dāng)?shù)劁N(xiāo)售人員和經(jīng)銷(xiāo)商,但不提供免費(fèi)更換服務(wù)。
? 注意事項(xiàng):
1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 產(chǎn)品使用:本產(chǎn)品僅能用于科研。本產(chǎn)品未通過(guò)直接用于活體動(dòng)物和人的審核。本產(chǎn)品未通過(guò)用于活體診斷的審核。
LNCaP clone FGC人前列腺癌細(xì)胞說(shuō)明書(shū)CELL-C0543.pdf