CELL-C0174 NRK-52E大鼠腎細(xì)胞
- 貨號(hào): CELL-C0174
- 規(guī)格: 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
- 價(jià)格: 1200元
組織來源:正常腎
生長(zhǎng)狀態(tài):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞
培養(yǎng)條件:
培養(yǎng)基類型:DMEM培養(yǎng)基:95%
FBS: 5%
培養(yǎng)條件:37℃,CO2: 5%
傳代方法:
? 收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài):
1) 如果沒長(zhǎng)滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時(shí)(4h左右),穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),靜置后鏡檢,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
2) 如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
? 貼壁細(xì)胞傳代方法:
1) 棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次;
2) 加1ml 0.25%的胰酶,讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸,隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓后加完全培養(yǎng)基終止消化。
? 懸浮細(xì)胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。
1) 直接傳代是讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng);
2) 離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi), 1000rpm,5分鐘,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
凍存方法:
?90%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
?儲(chǔ)存:液氮中長(zhǎng)期保存。
? 訂購須知:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)撥打電話或郵箱聯(lián)系;
注:觀察細(xì)胞最好在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度;
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等;
3. 本庫細(xì)胞在培養(yǎng)過程不加抗生素,請(qǐng)客戶收到細(xì)胞后根據(jù)需要自行添加雙抗(青霉素和鏈霉素);
4. 請(qǐng)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;
5. 本實(shí)驗(yàn)室默認(rèn)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng);
6. 建議客戶收到細(xì)胞后,留存一張培養(yǎng)瓶外觀照片以及收到的細(xì)胞前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通交流;
7. 細(xì)胞培養(yǎng)過程外因太多,我們的售后保障期為一周,具體處理原則參見售后流程圖( www.vnkw.cn)或咨詢當(dāng)?shù)劁N售人員和經(jīng)銷商,但不提供免費(fèi)更換服務(wù)。
? 注意事項(xiàng):
1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 產(chǎn)品使用:本產(chǎn)品僅能用于科研。本產(chǎn)品未通過直接用于活體動(dòng)物和人的審核。本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核。
NRE-52E-細(xì)胞說明書-2021.4.26.pdf